The Cultural ‘Clostridium perfringens’ in foods

บทนำทั่วไป
Clostridium perfringens เป็นแบคทีเรียรูปท่อน ย้อมติดสีแกรมบวก สร้างเอ็นโดสปอร์ไม่ต้องการสร้างสารพิษเมื่อมีการสร้างสปอร์ในอาหาร
ออกซิเจนในการเจริญสร้างสารพิษเมื่อมีการสร้างสปอร์ในอาหาร  สารพิษจะถูกปล่อยออกจากเซลล์เมื่อเซลล์ถูก
ทำลายทั้งในอาหารและในร่างกายภายหลังการบริโภค    ผู้บริโภคจะเกิดอาการปวดท้อง คลื่นไส้ อาเจียน ท้องร่วง

วัสดุอุปกรณ์   
1. Peptone water (B035/500g) หรือน้ำกลั่นที่ฆ่าเชื้อแล้วสำหรับเจือจางอาหาร
2. Cooked meat medium (B151/500g) ในหลอดที่เตรียมและผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว
3. วุ้นเข้มข้น 2 %
4. Tryptose sulfite cycloserine (B282/500g)  ผสม egg yolk(BF003/100 ml) ที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว
5. จานเพาะเชื้อที่ปราศจากเชื้อ
6. ตัวอย่างอาหาร
7. ชุดย้อมสีแกรม (Gram’s Iodine BA027/100 ml,Gram’s Safranin BA028/100 ml,Gram’s Crystal violet  BA087/100 ml)
8.   ปิเปตที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว

วิธีปฏิบัติ
1. เจือจางตัวอย่างอาหารให้มีความเจือจางที่เหมาะสมด้วยน้ำกลั่น หรือ Peptone water (B035/500g)
2. เติมตัวอย่างอาหาร 1 มิลลิลิตร ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ Cooked meat medium (B151/500g)  
10 มิลลิลิตรในหลอด แล้วเททับหน้าด้วยวุ้น 2 % บ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส นาน 24 ชั่วโมงใน สภาวะไร้ออกซิเจน
3.Streak เชื้อลงในจานอาหารเลี้ยงเชื้อ Tryptose sulfite cycloserine (B282/500g)  ผสม egg yolk(BF003/100 ml)
 บ่มที่อุณหภูมิ35 องศาเซลเซียส นาน 24 ชั่วโมงในสภาวะไร้ออกซิเจน
4. สังเกตโคโลนีสีดำขนาด 2-4 มิลลิเมตร รอบโคโลนีมีตะกอนขุ่นขาว เลือกมาย้อมสีแกรม Clostridium perfringens
จะมีรูปร่างเป็นท่อน ย้อมติดสีแกรมบวก

                   ****หมายเหตุ  บทความนี้ไม่สามารถใช้อ้างอิงเชิงวิชาการ****
***บริษัทฯใคร่ขอขอบพระคุณอาจารย์ สุมาลี  เหลืองสกุล     จุลชีววิทยาทางอาหาร     ผู้เป็นเจ้าของลิขสิทธิ์หนังสือและเราไม่มีเจตนาจะแสวงหาประโยชน์อื่นนอกจากให้ผู้ใช้เกิดประโยชน์ในการเลือกใช้สินค้าเท่านั้น
***บริษัทฯขอสงวนสิทธิ์ในการเปลี่ยนแปลง แก้ไขเพิ่มเติม เพื่อความสะดวกในการศึกษา****
บรรณานุกรม
สุมาลี  เหลืองสกุล  2539   จุลชีววิทยาทางอาหาร    ฉบับปรับปรุงใหม่ โรงพิมพ์ชัยเจริญ กรุงเทพฯ
Barnett, H.L. 1955. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. Burgess, Minneapolis. Collins, C.H.;P.M, Lyne. And J.M Grange. 1995.
            Microbiology. Difco Laboratories incorporated Detroid Michigan . USA.  DiLiello, L.R 1982. Methods in Food and Dairy Microbiology. AVI Publishing Company, Inc
Principle and Specific Application. Oxford: Blackwell Scientific  Publications. Johnson, T.R.; C.L. Case.1989.  Laboratory Experiments in Microbiology. Brief ed., Second ed. The benjamin/ Cummings Publishing Company. Inc. New York.